ymholibg

Cyfuniad o gyfansoddion terpene yn seiliedig ar olewau hanfodol planhigion fel meddyginiaeth larvidal ac oedolyn yn erbyn Aedes aegypti (Diptera: Culicidae)

Diolch am ymweld â Nature.com.Mae gan y fersiwn o'r porwr rydych chi'n ei ddefnyddio gefnogaeth CSS gyfyngedig.I gael y canlyniadau gorau, rydym yn argymell eich bod yn defnyddio fersiwn mwy diweddar o'ch porwr (neu analluogi Modd Cydnawsedd yn Internet Explorer).Yn y cyfamser, er mwyn sicrhau cefnogaeth barhaus, rydym yn dangos y wefan heb steilio na JavaScript.
Gall cyfuniadau o gyfansoddion pryfleiddiad sy'n deillio o blanhigion ddangos rhyngweithiadau synergaidd neu wrthwynebol yn erbyn plâu.O ystyried lledaeniad cyflym clefydau a gludir gan fosgitos Aedes a gwrthiant cynyddol poblogaethau mosgito Aedes i bryfladdwyr traddodiadol, lluniwyd wyth ar hugain o gyfuniadau o gyfansoddion terpene yn seiliedig ar olewau hanfodol planhigion a'u profi yn erbyn cyfnodau larfal ac oedolion Aedes aegypti.Gwerthuswyd pum olew hanfodol planhigion (EOs) i ddechrau am eu heffeithiolrwydd larvidal a defnydd oedolion, a nodwyd dau gyfansoddyn mawr ym mhob EO yn seiliedig ar ganlyniadau GC-MS.Prynwyd y prif gyfansoddion a nodwyd, sef disulfide deialyl, trisulfide deialol, carvone, limonene, ewgenol, methyl eugenol, ewcalyptol, eudesmol a mosgito alffa-pinene.Yna paratowyd cyfuniadau deuaidd o'r cyfansoddion hyn gan ddefnyddio dosau sublethal a phrofwyd eu heffeithiau synergaidd ac antagonistaidd a phenderfynwyd arnynt.Ceir y cyfansoddiadau larvidal gorau trwy gymysgu limonene â disulfide deialol, a cheir y cyfansoddiadau llawnladdol gorau trwy gymysgu carvone â limonene.Profwyd y larvicide synthetig Tempos a ddefnyddir yn fasnachol a'r cyffur oedolion Malathion ar wahân ac mewn cyfuniadau deuaidd â terpenoidau.Dangosodd y canlyniadau mai'r cyfuniad o temephos a disulfide diallyl a malathion ac eudesmol oedd y cyfuniad mwyaf effeithiol.Mae gan y cyfuniadau cryf hyn botensial i'w defnyddio yn erbyn Aedes aegypti.
Mae olewau hanfodol planhigion (EOs) yn fetabolion eilaidd sy'n cynnwys amrywiol gyfansoddion bioactif ac maent yn dod yn fwyfwy pwysig fel dewis amgen i blaladdwyr synthetig.Nid yn unig y maent yn gyfeillgar i'r amgylchedd ac yn hawdd eu defnyddio, ond maent hefyd yn gymysgedd o wahanol gyfansoddion bioactif, sydd hefyd yn lleihau'r tebygolrwydd o ddatblygu ymwrthedd i gyffuriau1.Gan ddefnyddio technoleg GC-MS, archwiliodd ymchwilwyr gyfansoddion olewau hanfodol planhigion amrywiol a nodi mwy na 3,000 o gyfansoddion o 17,500 o blanhigion aromatig2, y profwyd y rhan fwyaf ohonynt am briodweddau pryfleiddiad ac adroddir bod ganddynt effeithiau pryfleiddiad3,4.Mae rhai astudiaethau'n amlygu bod gwenwyndra prif gydran y cyfansoddyn yr un fath neu'n fwy na'i ethylene ocsid crai.Ond efallai y bydd defnyddio cyfansoddion unigol yn gadael lle eto i ddatblygu ymwrthedd, fel sy'n wir gyda phryfleiddiaid cemegol5,6.Felly, mae'r ffocws presennol ar baratoi cymysgeddau o gyfansoddion sy'n seiliedig ar ethylene ocsid i wella effeithiolrwydd pryfleiddiad a lleihau'r tebygolrwydd o ymwrthedd mewn poblogaethau plâu targed.Gall cyfansoddion gweithredol unigol sy'n bresennol mewn EOs arddangos effeithiau synergaidd neu elyniaethus mewn cyfuniadau sy'n adlewyrchu gweithgaredd cyffredinol y EO, ffaith sydd wedi'i phwysleisio'n dda mewn astudiaethau a gynhaliwyd gan ymchwilwyr blaenorol7,8.Mae'r rhaglen rheoli fector hefyd yn cynnwys EO a'i gydrannau.Mae gweithgaredd mosgitoladdol olewau hanfodol wedi'i astudio'n helaeth ar fosgitos Culex ac Anopheles.Mae sawl astudiaeth wedi ceisio datblygu plaladdwyr effeithiol trwy gyfuno planhigion amrywiol â phlaladdwyr synthetig a ddefnyddir yn fasnachol i gynyddu gwenwyndra cyffredinol a lleihau sgîl-effeithiau9.Ond mae astudiaethau o gyfansoddion o'r fath yn erbyn Aedes aegypti yn parhau i fod yn brin.Mae datblygiadau mewn gwyddoniaeth feddygol a datblygiad cyffuriau a brechlynnau wedi helpu i frwydro yn erbyn rhai clefydau a gludir gan fector.Ond mae presenoldeb gwahanol seroteipiau o'r firws, a drosglwyddir gan y mosgito Aedes aegypti, wedi arwain at fethiant rhaglenni brechu.Felly, pan fydd clefydau o'r fath yn digwydd, rhaglenni rheoli fector yw'r unig opsiwn i atal y clefyd rhag lledaenu.Yn y senario presennol, mae rheoli Aedes aegypti yn bwysig iawn gan ei fod yn fector allweddol o feirysau amrywiol a'u seroteipiau sy'n achosi twymyn dengue, Zika, twymyn hemorrhagic dengue, twymyn melyn, ac ati Y peth mwyaf nodedig yw'r ffaith bod nifer y mae achosion o bron bob clefyd a gludir gan fectorau yn yr Aedes yn cynyddu bob blwyddyn yn yr Aifft ac yn cynyddu ledled y byd.Felly, yn y cyd-destun hwn, mae angen datblygu mesurau rheoli effeithiol sy'n gyfeillgar i'r amgylchedd ar fyrder ar gyfer poblogaethau Aedes aegypti.Ymgeiswyr posibl yn hyn o beth yw EOs, eu cyfansoddion cyfansoddol, a'u cyfuniadau.Felly, ceisiodd yr astudiaeth hon nodi cyfuniadau synergaidd effeithiol o gyfansoddion EO planhigion allweddol o bum planhigyn â phriodweddau pryfleiddiol (hy, mintys, basil sanctaidd, Ewcalyptws braith, Allium sylffwr a melaleuca) yn erbyn Aedes aegypti.
Dangosodd yr holl EO a ddewiswyd weithgaredd larfladdol posibl yn erbyn Aedes aegypti gyda 24-h LC50 yn amrywio o 0.42 i 163.65 ppm.Cofnodwyd y gweithgaredd larvidal uchaf ar gyfer mintys pupur (Mp) EO gyda gwerth LC50 o 0.42 ppm ar 24 h, ac yna garlleg (As) gyda gwerth LC50 o 16.19 ppm ar 24 h (Tabl 1).
Ac eithrio Ocimum Sainttum, Os EO, roedd pob un o'r pedwar EO arall a sgriniwyd yn dangos effeithiau alercidal amlwg, gyda gwerthoedd LC50 yn amrywio o 23.37 i 120.16 ppm dros y cyfnod amlygiad 24 awr.Roedd Thymophilus striata (Cl) EO yn fwyaf effeithiol wrth ladd oedolion â gwerth LC50 o 23.37 ppm o fewn 24 awr i ddod i gysylltiad, ac yna Eucalyptus maculata (Em) a oedd â gwerth LC50 o 101.91 ppm (Tabl 1).Ar y llaw arall, nid yw gwerth LC50 ar gyfer Os wedi'i bennu eto gan fod y gyfradd marwolaethau uchaf o 53% wedi'i chofnodi ar y dos uchaf (Ffigur Atodol 3).
Cafodd y ddau brif gyfansoddyn cyfansoddol ym mhob EO eu nodi a'u dewis yn seiliedig ar ganlyniadau cronfa ddata llyfrgell NIST, canran ardal cromatogram GC, a chanlyniadau sbectra MS (Tabl 2).Ar gyfer EO As, y prif gyfansoddion a nodwyd oedd disulfide deialol a trisulfide deialol;ar gyfer EO Mp y prif gyfansoddion a nodwyd oedd carvone a limonene, ar gyfer EO Em y prif gyfansoddion a nodwyd oedd eudesmol ac ewcalyptol;Ar gyfer EO Os, y prif gyfansoddion a nodwyd oedd eugenol a methyl eugenol, ac ar gyfer EO Cl, y prif gyfansoddion a nodwyd oedd eugenol a α-pinene (Ffigur 1, Ffigurau Atodol 5-8, Tabl Atodol 1-5).
Canlyniadau sbectrometreg màs y prif terpenoidau o olewau hanfodol dethol (A-diallyl disulfide; B-diallyl trisulfide; C-eugenol; D-methyl eugenol; E-limonene; F-aromatig ceperone; G-α-pinene; H-sineole). ;R-eudamol).
Nodwyd cyfanswm o naw cyfansoddyn (deialyl disulfide, deiall trisulfide, eugenol, methyl eugenol, carvone, limonene, ewcalyptol, eudesmol, α-pinene) fel cyfansoddion effeithiol sy'n brif gydrannau EO a chawsant eu bioassay yn unigol yn erbyn Aedes aegypti ar larfal. cyfnodau..Roedd gan yr eudesmol cyfansawdd y gweithgaredd larvidal uchaf gyda gwerth LC50 o 2.25 ppm ar ôl 24 awr o amlygiad.Canfuwyd hefyd bod gan y cyfansoddion disulfide deialil a deiall trisulfide effeithiau larfladdol posibl, gyda dosau sublethal cymedrig yn yr ystod o 10-20 ppm.Arsylwyd gweithgaredd larfladdol cymedrol eto ar gyfer y cyfansoddion eugenol, limonene ac ewcalyptol gyda gwerthoedd LC50 o 63.35 ppm, 139.29 ppm.a 181.33 ppm ar ôl 24 awr, yn y drefn honno (Tabl 3).Fodd bynnag, ni ddarganfuwyd unrhyw botensial larvicidal sylweddol o methyl eugenol a charvone hyd yn oed ar y dosau uchaf, felly ni chyfrifwyd gwerthoedd LC50 (Tabl 3).Roedd gan y larfaladdwr synthetig Temephos grynodiad marwol cymedrig o 0.43 ppm yn erbyn Aedes aegypti dros 24 awr o amlygiad (Tabl 3, Tabl Atodol 6).
Nodwyd saith cyfansoddyn (diallyl disulfide, diallyl trisulfide, eucalyptol, α-pinene, eudesmol, limonene a carvone) fel prif gyfansoddion EO effeithiol ac fe'u profwyd yn unigol yn erbyn mosgitos Aedes Eifftaidd oedolion.Yn ôl dadansoddiad atchweliad Probit, canfuwyd bod gan Eudesmol y potensial uchaf gyda gwerth LC50 o 1.82 ppm, ac yna Eucalyptol gyda gwerth LC50 o 17.60 ppm ar amser amlygiad 24 awr.Roedd y pum cyfansoddyn arall a brofwyd yn weddol niweidiol i oedolion gyda LC50s yn amrywio o 140.79 i 737.01 ppm (Tabl 3).Roedd y malathion organoffosfforws synthetig yn llai grymus nag eudesmol ac yn uwch na'r chwe chyfansoddyn arall, gyda gwerth LC50 o 5.44 ppm dros y cyfnod amlygiad 24 awr (Tabl 3, Tabl Atodol 6).
Dewiswyd saith cyfansoddyn plwm cryf a'r tamephosate organoffosphorus i ffurfio cyfuniadau deuaidd o'u dosau LC50 mewn cymhareb 1:1.Paratowyd a phrofwyd cyfanswm o 28 o gyfuniadau deuaidd am eu heffeithiolrwydd larfaol yn erbyn Aedes aegypti.Canfuwyd bod naw cyfuniad yn synergaidd, roedd 14 cyfuniad yn elyniaethus, ac nid oedd pum cyfuniad yn larfaol.Ymhlith y cyfuniadau synergaidd, y cyfuniad o disulfide deialol a themofol oedd y mwyaf effeithiol, a gwelwyd marwolaethau o 100% ar ôl 24 awr (Tabl 4).Yn yr un modd, roedd cymysgeddau o limonen gyda disulfide deialol ac ewgenol gyda thymetphos yn dangos potensial da gyda marwolaeth larfal a welwyd o 98.3% (Tabl 5).Roedd y 4 cyfuniad sy'n weddill, sef eudesmol ynghyd â ewcalyptol, eudesmol ynghyd â limonene, ewcalyptol ynghyd â alffa-pinene, alffa-pinene a temephos, hefyd yn dangos effeithiolrwydd larvidal sylweddol, gyda chyfraddau marwolaethau a welwyd yn fwy na 90%.Mae'r gyfradd marwolaethau disgwyliedig yn agos at 60-75%.(Tabl 4).Fodd bynnag, roedd y cyfuniad o limonene ag α-pinene neu ewcalyptws yn dangos adweithiau antagonistaidd.Yn yr un modd, canfuwyd bod cymysgeddau o Temephos ag ewgenol neu ewcalyptws neu eudesmol neu trisulfide deialol yn cael effeithiau antagonistaidd.Yn yr un modd, mae'r cyfuniad o disulfide deialol a deiall trisulfide a'r cyfuniad o'r naill neu'r llall o'r cyfansoddion hyn ag eudesmol neu eugenol yn wrthwynebol yn eu gweithred larfaol.Mae antagoniaeth hefyd wedi'i adrodd gyda chyfuniad o eudesmol ag eugenol neu α-pinene.
O'r 28 cymysgedd deuaidd a brofwyd ar gyfer gweithgaredd asidig oedolion, roedd 7 cyfuniad yn synergaidd, ni chafodd 6 unrhyw effaith, ac roedd 15 yn elyniaethus.Canfuwyd bod cymysgeddau o eudesmol ag ewcalyptws a limonene â charvone yn fwy effeithiol na chyfuniadau synergaidd eraill, gyda chyfraddau marwolaethau ar 24 awr o 76% a 100%, yn y drefn honno (Tabl 5).Gwelwyd bod Malathion yn arddangos effaith synergaidd gyda phob cyfuniad o gyfansoddion ac eithrio limonene a trisulfide deialol.Ar y llaw arall, canfuwyd gelyniaeth rhwng disulfide deialol a trisulfide deialol a'r cyfuniad o'r naill neu'r llall ag ewcalyptws, neu ewcalyptol, neu garvone, neu limonene.Yn yr un modd, dangosodd cyfuniadau o α-pinene ag eudesmol neu limonene, ewcalyptol gyda charvone neu limonene, a limonene ag eudesmol neu malathion effeithiau larfaol antagonistaidd.Ar gyfer y chwe chyfuniad arall, nid oedd gwahaniaeth arwyddocaol rhwng marwolaethau disgwyliedig a marwolaethau a arsylwyd (Tabl 5).
Yn seiliedig ar effeithiau synergaidd a dosau sublethal, yn y pen draw, dewiswyd eu gwenwyndra larvidal yn erbyn nifer fawr o fosgitos Aedes aegypti a'u profi ymhellach.Dangosodd y canlyniadau fod y marwolaethau larfâu a arsylwyd gan ddefnyddio'r cyfuniadau deuaidd ewgenol-limonen, deilyl disulfide-limonene a disulfide-timephos deialol yn 100%, tra bod y marwolaethau larfa disgwyliedig yn 76.48%, 72.16% a 63.4%, yn y drefn honno (Tabl 6)..Roedd y cyfuniad o limonene ac eudesmol yn gymharol llai effeithiol, a gwelwyd marwolaethau larfal o 88% dros y cyfnod datguddio 24 awr (Tabl 6).I grynhoi, roedd y pedwar cyfuniad deuaidd a ddewiswyd hefyd yn dangos effeithiau larfladdol synergaidd yn erbyn Aedes aegypti o'u cymhwyso ar raddfa fawr (Tabl 6).
Dewiswyd tri chyfuniad synergaidd ar gyfer y bioassay o oedolion-laddiad i reoli poblogaethau mawr o oedolion Aedes aegypti.Er mwyn dewis cyfuniadau i'w profi ar gytrefi pryfed mawr, fe wnaethom ganolbwyntio'n gyntaf ar y ddau gyfuniad terpene synergaidd gorau, sef carvone plus limonene ac eucalyptol plus eudesmol.Yn ail, dewiswyd y cyfuniad synergaidd gorau o'r cyfuniad o malathion organoffosffad synthetig a terpenoidau.Credwn mai'r cyfuniad o malathion ac eudesmol yw'r cyfuniad gorau ar gyfer profi ar gytrefi pryfed mawr oherwydd y marwolaethau uchaf a arsylwyd a gwerthoedd LC50 isel iawn o'r cynhwysion ymgeisydd.Mae Malathion yn arddangos synergedd mewn cyfuniad â α-pinene, disulfide deialol, ewcalyptws, carvone ac eudesmol.Ond os edrychwn ar y gwerthoedd LC50, Eudesmol sydd â'r gwerth isaf (2.25 ppm).Y gwerthoedd LC50 a gyfrifwyd o malathion, α-pinene, disulfide deialol, ewcalyptol a charvone oedd 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 a 140.79 ppm.yn y drefn honno.Mae'r gwerthoedd hyn yn nodi mai'r cyfuniad o malathion ac eudesmol yw'r cyfuniad gorau posibl o ran dos.Dangosodd y canlyniadau fod y cyfuniadau o garvone plws limonene ac eudesmol plus malathion wedi gweld 100% o farwolaethau o gymharu â marwolaethau disgwyliedig o 61% i 65%.Dangosodd cyfuniad arall, eudesmol ac eucalyptol, gyfradd marwolaethau o 78.66% ar ôl 24 awr o amlygiad, o gymharu â chyfradd marwolaethau disgwyliedig o 60%.Dangosodd y tri chyfuniad a ddewiswyd effeithiau synergyddol hyd yn oed o'u cymhwyso ar raddfa fawr yn erbyn Aedes aegypti oedolion (Tabl 6).
Yn yr astudiaeth hon, dangosodd EOs planhigion dethol fel Mp, As, Os, Em a Cl effeithiau angheuol addawol ar gamau larfal ac oedolion Aedes aegypti.Roedd gan Mp EO y gweithgaredd larvidal uchaf gyda gwerth LC50 o 0.42 ppm, ac yna As, Os ac Em EOs gyda gwerth LC50 o lai na 50 ppm ar ôl 24 h.Mae'r canlyniadau hyn yn gyson ag astudiaethau blaenorol o fosgitos a phryfed dipterous eraill10,11,12,13,14.Er bod potency larvicidal Cl yn is nag olewau hanfodol eraill, gyda gwerth LC50 o 163.65 ppm ar ôl 24 awr, ei botensial oedolyn yw'r uchaf gyda gwerth LC50 o 23.37 ppm ar ôl 24 awr.Roedd Mp, As and Em EOs hefyd yn dangos potensial alercidal da gyda gwerthoedd LC50 yn yr ystod o 100-120 ppm ar 24 h o amlygiad, ond roeddent yn gymharol is na'u heffeithiolrwydd larvicidal.Ar y llaw arall, dangosodd EO Os effaith alerladdol ddibwys hyd yn oed ar y dos therapiwtig uchaf.Felly, mae'r canlyniadau'n dangos y gall gwenwyndra ethylene ocsid i blanhigion amrywio yn dibynnu ar gam datblygiadol mosgitos15.Mae hefyd yn dibynnu ar gyfradd treiddiad EOs i gorff y pryfed, eu rhyngweithio ag ensymau targed penodol, a gallu dadwenwyno'r mosgito ym mhob cam datblygiadol16.Mae nifer fawr o astudiaethau wedi dangos bod y prif gydran cyfansawdd yn ffactor pwysig yn y gweithgaredd biolegol o ethylene ocsid, gan ei fod yn cyfrif am y rhan fwyaf o gyfanswm y cyfansoddion3,12,17,18.Felly, gwnaethom ystyried dau brif gyfansoddyn ym mhob EO.Yn seiliedig ar ganlyniadau GC-MS, nodwyd disulfide deialol a trisulfide deialu fel prif gyfansoddion EO As, sy'n gyson ag adroddiadau blaenorol19,20,21.Er bod adroddiadau blaenorol yn nodi bod menthol yn un o'i brif gyfansoddion, nodwyd carvone a limonene eto fel prif gyfansoddion Mp EO22,23.Dangosodd proffil cyfansoddiad Os EO mai eugenol a methyl eugenol yw'r prif gyfansoddion, sy'n debyg i ganfyddiadau ymchwilwyr cynharach16,24.Mae eucalyptol ac eucalyptol wedi'u hadrodd fel y prif gyfansoddion sy'n bresennol mewn olew deilen Em, sy'n gyson â chanfyddiadau rhai ymchwilwyr25,26 ond yn groes i ganfyddiadau Olalade et al.27.Gwelwyd goruchafiaeth cineole a α-pinene mewn olew hanfodol melaleuca, sy'n debyg i astudiaethau blaenorol28,29.Adroddwyd am wahaniaethau rhyng-benodol yng nghyfansoddiad a chrynodiad olewau hanfodol a dynnwyd o'r un rhywogaethau planhigion mewn gwahanol leoliadau a gwelwyd hefyd yn yr astudiaeth hon, sy'n cael eu dylanwadu gan amodau twf planhigion daearyddol, amser cynhaeaf, cyfnod datblygu, neu oedran planhigion.ymddangosiad cemoteipiau, etc.22,30,31,32.Yna prynwyd y cyfansoddion allweddol a nodwyd a'u profi am eu heffeithiau larfaol a'u heffeithiau ar fosgitos Aedes aegypti oedolion.Dangosodd y canlyniadau fod gweithgaredd larfaladdol disulfide deialol yn debyg i weithgaredd EO amrwd As.Ond mae gweithgaredd diallyl trisulfide yn uwch nag EO As.Mae'r canlyniadau hyn yn debyg i'r rhai a gafwyd gan Kimbaris et al.33 ar y philippines Culex.Fodd bynnag, ni ddangosodd y ddau gyfansoddyn hyn weithgaredd hunanladdol da yn erbyn y mosgitos targed, sy'n gyson â chanlyniadau Plata-Rueda et al 34 ar Tenebrio molitor.Mae Os EO yn effeithiol yn erbyn cyfnod larfal Aedes aegypti, ond nid yn erbyn y cam oedolyn.Mae wedi'i sefydlu bod gweithgaredd larvicidal y prif gyfansoddion unigol yn is na gweithgaredd Os EO crai.Mae hyn yn awgrymu rôl i gyfansoddion eraill a'u rhyngweithiadau mewn ethylene ocsid crai.Ychydig iawn o weithgaredd sydd gan methyl eugenol yn unig, tra bod gan ewgenol yn unig weithgaredd larfladdol cymedrol.Mae'r casgliad hwn yn cadarnhau, ar y naill law,35,36, ac ar y llaw arall, yn gwrth-ddweud casgliadau ymchwilwyr cynharach37,38.Gall gwahaniaethau yn y grwpiau gweithredol ewgenol a methyleugenol arwain at wahanol wenwyndra i'r un pryfed targed39.Canfuwyd bod gan limonene weithgaredd larfaol cymedrol, tra bod effaith carvone yn ddibwys.Yn yr un modd, mae gwenwyndra cymharol isel limonene i bryfed llawndwf a gwenwyndra uchel carvone yn ategu canlyniadau rhai astudiaethau blaenorol40 ond yn gwrth-ddweud eraill41.Gall presenoldeb bondiau dwbl mewn safleoedd mewngylchol ac allgylchol gynyddu buddion y cyfansoddion hyn fel larfaladdwyr3,41, tra gall carvone, sef ceton â charbonau alffa a beta annirlawn, ddangos potensial uwch ar gyfer gwenwyndra mewn oedolion42.Fodd bynnag, mae nodweddion unigol limonene a charvone yn llawer is na chyfanswm EO Mp (Tabl 1, Tabl 3).Ymhlith y terpenoidau a brofwyd, canfuwyd bod gan eudesmol y gweithgaredd larvidal ac oedolion mwyaf gyda gwerth LC50 o dan 2.5 ppm, gan ei wneud yn gyfansoddyn addawol ar gyfer rheoli mosgitos Aedes.Mae ei berfformiad yn well na pherfformiad yr EO Em cyfan, er nad yw hyn yn gyson â chanfyddiadau Cheng et al.40.Mae Eudesmol yn sesquiterpene gyda dwy uned isoprene sy'n llai cyfnewidiol na monoterpenau ocsigenedig fel ewcalyptws ac felly mae ganddo fwy o botensial fel plaladdwr.Mae gan Eucalyptol ei hun fwy o weithgarwch oedolion na larfladdol, ac mae canlyniadau astudiaethau cynharach yn cefnogi ac yn gwrthbrofi hyn37,43,44.Mae'r gweithgaredd ar ei ben ei hun bron yn debyg i weithgaredd y EO Cl.Mae monoterpene bicyclic arall, α-pinene, yn cael llai o effaith oedolyn ar Aedes aegypti nag effaith larvicidal, sef y gwrthwyneb i effaith EO Cl llawn.Mae gweithgaredd pryfleiddiad cyffredinol terpenoidau yn cael ei ddylanwadu gan eu lipophilicity, anweddolrwydd, canghennog carbon, arwynebedd taflunio, arwynebedd, grwpiau gweithredol a'u safleoedd45,46.Gall y cyfansoddion hyn weithredu trwy ddinistrio croniadau celloedd, rhwystro gweithgaredd anadlol, torri ar draws trosglwyddiad ysgogiadau nerfol, ac ati 47 Canfuwyd bod gan yr organoffosffad synthetig Temephos y gweithgaredd larvidal uchaf gyda gwerth LC50 o 0.43 ppm, sy'n gyson â data Lek - Utala48.Adroddwyd bod gweithgaredd oedolion o'r malathion organoffosfforws synthetig yn 5.44 ppm.Er bod y ddau organoffosffad hyn wedi dangos ymatebion ffafriol yn erbyn straenau labordy o Aedes aegypti, mae ymwrthedd mosgito i'r cyfansoddion hyn wedi'i adrodd mewn gwahanol rannau o'r byd49.Fodd bynnag, ni ddarganfuwyd unrhyw adroddiadau tebyg o ddatblygiad ymwrthedd i feddyginiaethau llysieuol50.Felly, ystyrir botaneg fel dewisiadau amgen posibl i blaladdwyr cemegol mewn rhaglenni rheoli fectorau.
Profwyd yr effaith larvidal ar 28 cyfuniad deuaidd (1:1) a baratowyd o terpenoidau cryf a terpenoidau â thymetffos, a chanfuwyd bod 9 cyfuniad yn synergaidd, 14 yn wrthwynebol a 5 yn wrthwynebol.Dim effaith.Ar y llaw arall, yn y bioassay nerth oedolion, canfuwyd bod 7 cyfuniad yn synergaidd, roedd 15 cyfuniad yn wrthun, a nodwyd nad oedd 6 chyfuniad yn cael unrhyw effaith.Mae'n bosibl mai'r rheswm pam y mae rhai cyfuniadau penodol yn cynhyrchu effaith synergaidd yw'r ffaith bod y cyfansoddion ymgeisydd yn rhyngweithio ar yr un pryd mewn gwahanol lwybrau pwysig, neu i ataliad dilyniannol gwahanol ensymau allweddol llwybr biolegol penodol51.Canfuwyd bod y cyfuniad o limonene â disulfide deialol, ewcalyptws neu ewgenol yn synergaidd mewn cymwysiadau bach a mawr (Tabl 6), tra canfuwyd bod ei gyfuniad ag ewcalyptws neu α-pinene yn cael effeithiau antagonistaidd ar larfa.Ar gyfartaledd, mae limonene yn ymddangos yn synergydd da, o bosibl oherwydd presenoldeb grwpiau methyl, treiddiad da i'r stratum corneum, a mecanwaith gweithredu gwahanol52,53.Adroddwyd yn flaenorol y gall limonene achosi effeithiau gwenwynig trwy dreiddio cwtiglau pryfed (gwenwyndra cyswllt), gan effeithio ar y system dreulio (gwrthfeedant), neu effeithio ar y system resbiradol (gweithgarwch mygdarthu), 54 tra gall ffenylpropanoidau fel ewgenol effeithio ar ensymau metabolaidd 55. Felly, gall cyfuniadau o gyfansoddion â gwahanol fecanweithiau gweithredu gynyddu effaith angheuol gyffredinol y cymysgedd.Canfuwyd bod Ewcalyptol yn synergaidd â disulfide deialol, ewcalyptws neu α-pinene, ond roedd cyfuniadau eraill â chyfansoddion eraill naill ai'n anlarfigaidd neu'n antagonistaidd.Dangosodd astudiaethau cynnar fod gan ewcalyptol weithgaredd ataliol ar acetylcholinesterase (AChE), yn ogystal â derbynyddion octaamine a GABA56.Gan y gall fod gan monoterpenes cylchol, ewcalyptol, ewgenol, ac ati yr un mecanwaith gweithredu â'u gweithgaredd niwrowenwynig, 57 gan leihau eu heffeithiau cyfunol trwy ataliad ar y cyd.Yn yr un modd, canfuwyd bod y cyfuniad o Temephos â disulfide deialol, α-pinene a limonene yn synergyddol, gan gefnogi adroddiadau blaenorol o effaith synergaidd rhwng cynhyrchion llysieuol ac organoffosffadau synthetig58.
Canfuwyd bod y cyfuniad o eudesmol ac ewcalyptol yn cael effaith synergaidd ar gamau larfal ac oedolion Aedes aegypti, o bosibl oherwydd eu gwahanol ddulliau gweithredu oherwydd eu strwythurau cemegol gwahanol.Gall Eudesmol (sesquiterpene) effeithio ar y system resbiradol 59 a gall ewcalyptol (monoterpene) effeithio ar acetylcholinesteras 60 .Gallai cyd-amlygiad y cynhwysion i ddau neu fwy o safleoedd targed wella effaith angheuol gyffredinol y cyfuniad.Mewn bio-asesiadau sylweddau oedolion, canfuwyd bod malathion yn synergaidd â charvone neu ewcalyptol neu ewcalyptol neu deialyl disulfide neu α-pinene, sy'n nodi ei fod yn synergaidd ag ychwanegu limonene a di.Ymgeiswyr alergaidd synergaidd da ar gyfer y portffolio cyfan o gyfansoddion terpene, ac eithrio trisulfide allyl.Adroddodd Thangam a Katharesan61 hefyd ganlyniadau tebyg o effaith synergaidd malathion gyda darnau llysieuol.Gall yr ymateb synergyddol hwn fod oherwydd effeithiau gwenwynig cyfun malathion a ffytogemegau ar ensymau dadwenwyno pryfed.Yn gyffredinol, mae organoffosffadau fel malathion yn gweithredu trwy atal cytochrome P450 esterases a monooxygenases62,63,64.Felly, gall cyfuno malathion â'r mecanweithiau gweithredu hyn a terpenau â gwahanol fecanweithiau gweithredu wella'r effaith angheuol gyffredinol ar fosgitos.
Ar y llaw arall, mae antagoniaeth yn dangos bod y cyfansoddion a ddewiswyd yn llai gweithredol mewn cyfuniad na phob cyfansoddyn yn unig.Efallai mai'r rheswm dros elyniaeth mewn rhai cyfuniadau yw bod un cyfansoddyn yn addasu ymddygiad y cyfansoddyn arall trwy newid cyfradd amsugno, dosbarthiad, metaboledd, neu ysgarthiad.Roedd ymchwilwyr cynnar o'r farn mai hyn oedd achos antagoniaeth mewn cyfuniadau cyffuriau.Moleciwlau Mecanwaith posibl 65. Yn yr un modd, gall achosion posibl gelyniaeth fod yn gysylltiedig â mecanweithiau gweithredu tebyg, cystadleuaeth cyfansoddion cyfansoddol ar gyfer yr un derbynnydd neu safle targed.Mewn rhai achosion, gall ataliad anghystadleuol o'r protein targed ddigwydd hefyd.Yn yr astudiaeth hon, dangosodd dau gyfansoddyn organosylffwr, disulfide deialol a trisulfide deialol, effeithiau antagonistaidd, o bosibl oherwydd cystadleuaeth ar gyfer yr un safle targed.Yn yr un modd, dangosodd y ddau gyfansoddyn sylffwr hyn effeithiau antagonistaidd ac ni chawsant unrhyw effaith o'u cyfuno ag eudesmol a α-pinene.Mae eudesmol ac alffa-pinene yn gylchol eu natur, tra bod disulfide deialol a trisulfide deialol yn aliffatig eu natur.Yn seiliedig ar y strwythur cemegol, dylai'r cyfuniad o'r cyfansoddion hyn gynyddu'r gweithgaredd angheuol cyffredinol gan fod eu safleoedd targed fel arfer yn wahanol34,47, ond yn arbrofol daethom o hyd i elyniaeth, a all fod oherwydd rôl y cyfansoddion hyn mewn rhai organebau anhysbys in vivo.systemau o ganlyniad i ryngweithio.Yn yr un modd, cynhyrchodd y cyfuniad o cineole a α-pinene ymatebion antagonistaidd, er bod ymchwilwyr wedi adrodd yn flaenorol bod gan y ddau gyfansoddyn dargedau gweithredu gwahanol47,60.Gan fod y ddau gyfansoddyn yn monoterpenau cylchol, efallai y bydd rhai safleoedd targed cyffredin a allai gystadlu am rwymo a dylanwadu ar wenwyndra cyffredinol y parau cyfun a astudiwyd.
Yn seiliedig ar werthoedd LC50 a marwolaethau a arsylwyd, dewiswyd y ddau gyfuniad terpene synergaidd gorau, sef y parau o carvone + limonene ac eucalyptol + eudesmol, yn ogystal â'r malathion organophosphorus synthetig â terpenes.Profwyd y cyfuniad synergaidd gorau posibl o gyfansoddion malathion + Eudesmol mewn bio-assay pryfleiddiad i oedolion.Targedu cytrefi pryfed mawr i gadarnhau a all y cyfuniadau effeithiol hyn weithio yn erbyn niferoedd mawr o unigolion dros ofodau datguddio cymharol fawr.Mae pob un o'r cyfuniadau hyn yn dangos effaith synergaidd yn erbyn heidiau mawr o bryfed.Cafwyd canlyniadau tebyg ar gyfer cyfuniad larfladdol synergaidd optimaidd a brofwyd yn erbyn poblogaethau mawr o larfa Aedes aegypti.Felly, gellir dweud bod y cyfuniad larvidal ac adulticidal effeithiol o gyfansoddion EO planhigion yn ymgeisydd cryf yn erbyn cemegau synthetig presennol a gellir ei ddefnyddio ymhellach i reoli poblogaethau Aedes aegypti.Yn yr un modd, gellir defnyddio cyfuniadau effeithiol o larfaladdwyr synthetig neu lygedladdwyr â terpenau hefyd i leihau'r dosau o thymetffos neu malathion a weinyddir i fosgitos.Gall y cyfuniadau synergaidd cryf hyn ddarparu atebion ar gyfer astudiaethau yn y dyfodol ar esblygiad ymwrthedd i gyffuriau mewn mosgitos Aedes.
Casglwyd wyau Aedes aegypti o'r Ganolfan Ymchwil Feddygol Ranbarthol, Dibrugarh, Cyngor Ymchwil Feddygol India a'u cadw dan reolaeth tymheredd (28 ± 1 ° C) a lleithder (85 ± 5%) yn Adran Sŵoleg, Prifysgol Gauhati o dan y yr amodau canlynol: Disgrifiwyd Arivoli et al.Ar ôl deor, cafodd larfâu bwyd larfa (powdr bisgedi cŵn a burum mewn cymhareb 3:1) a bwydwyd oedolion â hydoddiant glwcos o 10%.Gan ddechrau ar y 3ydd diwrnod ar ôl ymddangosiad, caniatawyd mosgitos benywaidd oedolion i sugno gwaed llygod mawr albino.Mwydwch y papur hidlo mewn dŵr mewn gwydr a'i roi yn y cawell dodwy wyau.
Samplau planhigion dethol sef dail ewcalyptws (Myrtaceae), basil sanctaidd (Lamiaceae), mintys (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) a bylbiau allium (Amaryllidaceae).Wedi'i gasglu o Guwahati a'i nodi gan Adran Botaneg, Prifysgol Gauhati.Bu'r samplau planhigion a gasglwyd (500 g) yn destun hydrodistyllu gan ddefnyddio cyfarpar Clevenger am 6 awr.Casglwyd yr EO a dynnwyd mewn ffiolau gwydr glân a'i storio ar 4°C i'w astudio ymhellach.
Astudiwyd gwenwyndra larvicidal gan ddefnyddio gweithdrefnau safonol Sefydliad Iechyd y Byd wedi'u haddasu ychydig 67 .Defnyddiwch DMSO fel emwlsydd.Profwyd pob crynodiad EO i ddechrau ar 100 a 1000 ppm, gan ddatgelu 20 larfa ym mhob atgynhyrchiad.Yn seiliedig ar y canlyniadau, cymhwyswyd ystod crynodiad a chofnodwyd marwolaethau o 1 awr i 6 awr (ar gyfnodau o 1 awr), ac ar 24 awr, 48 awr a 72 awr ar ôl triniaeth.Pennwyd crynodiadau islethal (LC50) ar ôl 24, 48 a 72 awr o amlygiad.Assayed pob crynodiad yn driphlyg ynghyd ag un rheolaeth negyddol (dŵr yn unig) ac un rheolaeth gadarnhaol (dŵr wedi'i drin gan DMSO).Os bydd chwilerod yn digwydd a bod mwy na 10% o larfa'r grŵp rheoli yn marw, ailadroddir yr arbrawf.Os yw’r gyfradd marwolaethau yn y grŵp rheoli rhwng 5-10%, defnyddiwch fformiwla cywiro Abbott 68.
Mae'r dull a ddisgrifiwyd gan Ramar et al.Defnyddiwyd 69 ar gyfer bioassay oedolion yn erbyn Aedes aegypti gan ddefnyddio aseton fel toddydd.Profwyd pob EO i ddechrau yn erbyn mosgitos Aedes aegypti oedolion mewn crynodiadau o 100 a 1000 ppm.Rhowch 2 ml o bob hydoddiant parod i'r rhif Whatman.1 darn o bapur hidlo (maint 12 x 15 cm2) a gadewch i'r aseton anweddu am 10 munud.Defnyddiwyd papur hidlo wedi'i drin â dim ond 2 ml o aseton fel rheolydd.Ar ôl i'r aseton anweddu, gosodir y papur hidlo wedi'i drin a'r papur hidlo rheoli mewn tiwb silindrog (10 cm o ddyfnder).Trosglwyddwyd deg mosgito bwydo di-waed 3 i 4 diwrnod oed i driphlygiaid o bob crynodiad.Yn seiliedig ar ganlyniadau profion rhagarweiniol, profwyd crynodiadau amrywiol o olewau dethol.Cofnodwyd marwolaethau ar 1 awr, 2 awr, 3 awr, 4 awr, 5 awr, 6 awr, 24 awr, 48 awr a 72 awr ar ôl rhyddhau mosgito.Cyfrifwch werthoedd LC50 ar gyfer amseroedd amlygiad o 24 awr, 48 awr a 72 awr.Os yw cyfradd marwolaethau'r lot rheoli yn fwy na 20%, ailadroddwch y prawf cyfan.Yn yr un modd, os yw'r gyfradd marwolaethau yn y grŵp rheoli yn fwy na 5%, addaswch y canlyniadau ar gyfer y samplau a gafodd eu trin gan ddefnyddio fformiwla Abbott68.
Perfformiwyd cromatograffaeth nwy (Agilent 7890A) a sbectrometreg màs (Accu TOF GCv, Jeol) i ddadansoddi cyfansoddion cyfansoddol yr olewau hanfodol a ddewiswyd.Roedd gan y GC synhwyrydd FID a cholofn capilari (HP5-MS).Y nwy cludo oedd heliwm, y gyfradd llif oedd 1 ml/munud.Mae rhaglen GC yn gosod Allium sativum i 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M ac Ocimum Sainttum i 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 - 280, ar gyfer mintys 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, ar gyfer ewcalyptws 20.60-1M-10-200-3M-30-280, ac ar gyfer coch Am fil o haenau maent yn nhw 10:60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
Nodwyd prif gyfansoddion pob EO yn seiliedig ar ganran yr ardal a gyfrifwyd o'r cromatogram GC a'r canlyniadau sbectrometreg màs (cyfeirir at gronfa ddata safonau NIST 70).
Dewiswyd y ddau gyfansoddyn mawr ym mhob EO yn seiliedig ar ganlyniadau GC-MS ac fe'u prynwyd gan Sigma-Aldrich ar 98-99% purdeb ar gyfer bio-asesiadau pellach.Profwyd y cyfansoddion am effeithiolrwydd larfaol ac oedolion yn erbyn Aedes aegypti fel y disgrifir uchod.Dadansoddwyd y larvicides synthetig tamephosate a ddefnyddir amlaf (Sigma Aldrich) a'r cyffur i oedolion malathion (Sigma Aldrich) i gymharu eu heffeithiolrwydd â chyfansoddion EO dethol, gan ddilyn yr un weithdrefn.
Paratowyd cymysgeddau deuaidd o gyfansoddion terpene dethol a chyfansoddion terpene ynghyd ag organoffosffadau masnachol (tilephos a malathion) trwy gymysgu dos LC50 pob cyfansoddyn ymgeisydd mewn cymhareb 1:1.Profwyd y cyfuniadau a baratowyd ar gamau larfa ac oedolion Aedes aegypti fel y disgrifir uchod.Perfformiwyd pob bioassay yn driphlyg ar gyfer pob cyfuniad ac yn driphlyg ar gyfer y cyfansoddion unigol a oedd yn bresennol ym mhob cyfuniad.Cofnodwyd marwolaeth y pryfed targed ar ôl 24 awr.Cyfrifwch y gyfradd marwolaethau ddisgwyliedig ar gyfer cymysgedd deuaidd gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol.
lle mae E = cyfradd marwolaethau ddisgwyliedig mosgitos Aedes aegypti mewn ymateb i gyfuniad deuaidd, hy cysylltiad (A + B).
Cafodd effaith pob cymysgedd deuaidd ei labelu fel synergaidd, antagonistig, neu ddim effaith yn seiliedig ar y gwerth χ2 a gyfrifwyd gan y dull a ddisgrifiwyd gan Pavla52.Cyfrifwch y gwerth χ2 ar gyfer pob cyfuniad gan ddefnyddio'r fformiwla ganlynol.
Diffiniwyd effaith cyfuniad fel synergaidd pan oedd y gwerth χ2 a gyfrifwyd yn fwy na'r gwerth tabl ar gyfer y graddau cyfatebol o ryddid (cyfwng hyder 95%) a phe canfuwyd bod y marwolaethau a arsylwyd yn uwch na'r marwolaethau disgwyliedig.Yn yr un modd, os yw'r gwerth χ2 a gyfrifwyd ar gyfer unrhyw gyfuniad yn fwy na'r gwerth tabl gyda rhai graddau o ryddid, ond bod y marwolaethau a arsylwyd yn is na'r marwolaethau disgwyliedig, ystyrir bod y driniaeth yn elyniaethus.Ac os yw gwerth cyfrifedig χ2 mewn unrhyw gyfuniad yn llai na gwerth y tabl yn y graddau rhyddid cyfatebol, ystyrir nad yw'r cyfuniad yn cael unrhyw effaith.
Dewiswyd tri i bedwar cyfuniad a allai fod yn synergaidd (100 larfa a 50 gweithgaredd larfaolaidd a phryfed llawndwf) i'w profi yn erbyn nifer fawr o bryfed.Oedolion) symud ymlaen fel yr uchod.Ynghyd â'r cymysgeddau, profwyd cyfansoddion unigol a oedd yn bresennol yn y cymysgeddau dethol hefyd ar niferoedd cyfartal o larfa Aedes aegypti ac oedolion.Y gymhareb gyfuniad yw un dos LC50 rhan o un cyfansoddyn ymgeisydd a dos rhan LC50 o'r cyfansoddyn cyfansoddol arall.Yn y bioassay gweithgaredd oedolion, diddymwyd cyfansoddion dethol yn y toddydd aseton a'u cymhwyso i bapur hidlo wedi'i lapio mewn cynhwysydd plastig silindrog 1300 cm3.Cafodd yr aseton ei anweddu am 10 munud a rhyddhawyd yr oedolion.Yn yr un modd, yn y bioassay larvicidal, diddymwyd dosau o gyfansoddion ymgeisydd LC50 yn gyntaf mewn cyfeintiau cyfartal o DMSO ac yna cymysgwyd â 1 litr o ddŵr wedi'i storio mewn cynwysyddion plastig 1300 cc, a rhyddhawyd y larfa.
Cynhaliwyd dadansoddiad tebygol o 71 o ddata marwolaethau a gofnodwyd gan ddefnyddio meddalwedd SPSS (fersiwn 16) a Minitab i gyfrifo gwerthoedd LC50.


Amser postio: Gorff-01-2024