Mae leishmaniasis visceral (VL), a elwir yn kala-azar yn is-gyfandir India, yn glefyd parasitig a achosir gan y protosoa fflangellog Leishmania a all fod yn angheuol os na chaiff ei drin ar unwaith. Y pryf tywod Phlebotomus argentipes yw'r unig fector wedi'i gadarnhau o VL yn Ne-ddwyrain Asia, lle mae'n cael ei reoli trwy chwistrellu gweddilliol dan do (IRS), pryfleiddiad synthetig. Mae defnyddio DDT mewn rhaglenni rheoli VL wedi arwain at ddatblygu ymwrthedd mewn pryfed tywod, felly mae DDT wedi'i ddisodli gan y pryfleiddiad alffa-cypermethrin. Fodd bynnag, mae alffa-cypermethrin yn gweithredu'n debyg i DDT, felly mae'r risg o ymwrthedd mewn pryfed tywod yn cynyddu o dan straen a achosir gan amlygiad dro ar ôl tro i'r pryfleiddiad hwn. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom asesu tueddiad mosgitos gwyllt a'u hepil F1 gan ddefnyddio bioasay potel CDC.
Fe gasglon ni fosgitos o 10 pentref yn ardal Muzaffarpur yn Bihar, India. Parhaodd wyth pentref i ddefnyddio mosgitos cryfder uchel.cypermethrinar gyfer chwistrellu dan do, rhoddodd un pentref y gorau i ddefnyddio cypermethrin cryfder uchel ar gyfer chwistrellu dan do, ac ni ddefnyddiodd un pentref cypermethrin cryfder uchel erioed ar gyfer chwistrellu dan do. Cafodd y mosgitos a gasglwyd eu hamlygu i ddos diagnostig wedi'i ddiffinio ymlaen llaw am gyfnod penodol (3 μg/ml am 40 munud), a chofnodwyd y gyfradd cwympo i lawr a'r marwolaethau 24 awr ar ôl dod i gysylltiad â nhw.
Roedd cyfraddau lladd mosgitos gwyllt yn amrywio o 91.19% i 99.47%, ac roedd cyfraddau eu cenedlaethau F1 yn amrywio o 91.70% i 98.89%. Bedair awr ar hugain ar ôl dod i gysylltiad â nhw, roedd marwolaethau mosgitos gwyllt yn amrywio o 89.34% i 98.93%, ac roedd cyfraddau eu cenhedlaeth F1 yn amrywio o 90.16% i 98.33%.
Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn dangos y gallai ymwrthedd ddatblygu yn P. argentipes, gan ddangos yr angen i fonitro a bod yn wyliadwrus yn barhaus i gynnal rheolaeth ar ôl i'r broses ddileu gael ei chyflawni.
Mae leishmaniasis visceral (VL), a elwir yn kala-azar yn is-gyfandir India, yn glefyd parasitig a achosir gan y protosoa fflangeledig Leishmania ac a drosglwyddir trwy frathiad pryfed tywod benywaidd heintiedig (Diptera: Myrmecophaga). Pryfed tywod yw'r unig fector wedi'i gadarnhau o VL yn Ne-ddwyrain Asia. Mae India yn agos at gyflawni'r nod o ddileu VL. Fodd bynnag, er mwyn cynnal cyfraddau achosion isel ar ôl dileu, mae'n hanfodol lleihau poblogaeth y fector i atal trosglwyddiad posibl.
Caiff rheoli mosgitos yn Ne-ddwyrain Asia ei gyflawni trwy chwistrellu gweddilliol dan do (IRS) gan ddefnyddio pryfleiddiaid synthetig. Mae ymddygiad gorffwys cyfrinachol y coesau arian yn ei gwneud yn darged addas ar gyfer rheoli pryfleiddiaid trwy chwistrellu gweddilliol dan do [1]. Mae chwistrellu gweddilliol dan do o dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) o dan y Rhaglen Rheoli Malaria Genedlaethol yn India wedi cael effeithiau sylweddol wrth reoli poblogaethau mosgitos a lleihau achosion VL yn sylweddol [2]. Ysgogodd y rheolaeth annisgwyl hon o VL Raglen Dileu VL India i fabwysiadu chwistrellu gweddilliol dan do fel y prif ddull o reoli coesau arian. Yn 2005, llofnododd llywodraethau India, Bangladesh, a Nepal femorandwm o ddealltwriaeth gyda'r nod o ddileu VL erbyn 2015 [3]. Nod ymdrechion dileu, sy'n cynnwys cyfuniad o reoli fectorau a diagnosis a thriniaeth gyflym o achosion dynol, oedd mynd i mewn i'r cyfnod cydgrynhoi erbyn 2015, targed a ddiwygiwyd wedi hynny i 2017 ac yna 2020.[4] Mae'r map ffordd byd-eang newydd i ddileu clefydau trofannol a esgeuluswyd yn cynnwys dileu VL erbyn 2030.[5]
Wrth i India fynd i mewn i'r cyfnod ôl-ddileu BCVD, mae'n hanfodol sicrhau nad yw ymwrthedd sylweddol i beta-cypermethrin yn datblygu. Y rheswm dros yr ymwrthedd yw bod gan DDT a cypermethrin yr un mecanwaith gweithredu, sef eu bod yn targedu'r protein VGSC[21]. Felly, gall y risg o ddatblygu ymwrthedd mewn pryfed tywod gynyddu oherwydd straen a achosir gan amlygiad rheolaidd i cypermethrin hynod bwerus. Felly mae'n hanfodol monitro a nodi poblogaethau posibl o bryfed tywod sy'n gwrthsefyll y pryfleiddiad hwn. Yn y cyd-destun hwn, amcan yr astudiaeth hon oedd monitro statws tueddiad pryfed tywod gwyllt gan ddefnyddio dosau diagnostig a hydau amlygiad a bennwyd gan Chaubey et al. [20] astudiodd P. argentipes o wahanol bentrefi yn ardal Muzaffarpur yn Bihar, India, a ddefnyddiodd systemau chwistrellu dan do yn barhaus a gafodd eu trin â cypermethrin (pentrefi IPS parhaus). Cymharwyd statws agoredrwydd P. argentipes gwyllt o bentrefi a oedd wedi rhoi'r gorau i ddefnyddio systemau chwistrellu dan do wedi'u trin â cypermethrin (pentrefi IPS blaenorol) a'r rhai nad oeddent erioed wedi defnyddio systemau chwistrellu dan do wedi'u trin â cypermethrin (pentrefi nad ydynt yn IPS) gan ddefnyddio bioasai potel y CDC.
Dewiswyd deg pentref ar gyfer yr astudiaeth (Ffig. 1; Tabl 1), ac roedd gan wyth ohonynt hanes o chwistrellu pyrethroidau synthetig (hypermethrin; wedi'u dynodi'n bentrefi hypermethrin parhaus) dan do yn barhaus ac roedd ganddynt achosion VL (o leiaf un achos) yn ystod y 3 blynedd diwethaf. O'r ddau bentref sy'n weddill yn yr astudiaeth, dewiswyd un pentref nad oedd yn gweithredu chwistrellu dan do o beta-cypermethrin (pentref nad yw'n chwistrellu dan do) fel y pentref rheoli a dewiswyd y pentref arall a oedd â chwistrellu dan do ysbeidiol o beta-cypermethrin (pentref chwistrellu dan do ysbeidiol/cyn bentref chwistrellu dan do) fel y pentref rheoli. Roedd dewis y pentrefi hyn yn seiliedig ar gydlynu â'r Adran Iechyd a'r Tîm Chwistrellu Dan Do a dilysu'r Cynllun Gweithredu Micro Chwistrellu Dan Do yn Ardal Muzaffarpur.
Map daearyddol o ardal Muzaffarpur yn dangos lleoliadau'r pentrefi a gynhwyswyd yn yr astudiaeth (1–10). Lleoliadau'r astudiaeth: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Paratowyd y map gan ddefnyddio meddalwedd QGIS (fersiwn 3.30.3) ac Open Assessment Shapefile.
Paratowyd y poteli ar gyfer yr arbrofion amlygiad yn ôl dulliau Chaubey et al. [20] a Denlinger et al. [22]. Yn gryno, paratowyd poteli gwydr 500 mL ddiwrnod cyn yr arbrawf a gorchuddiwyd wal fewnol y poteli â'r pryfleiddiad a nodwyd (y dos diagnostig o α-cypermethrin oedd 3 μg/mL) trwy roi hydoddiant aseton o'r pryfleiddiad (2.0 mL) ar waelod, waliau a chap y poteli. Yna sychwyd pob potel ar rholer mecanyddol am 30 munud. Yn ystod yr amser hwn, dadsgriwiwch y cap yn araf i ganiatáu i'r aseton anweddu. Ar ôl 30 munud o sychu, tynnwch y cap a chylchdrowch y botel nes bod yr holl aseton wedi anweddu. Yna gadawyd y poteli ar agor i sychu dros nos. Ar gyfer pob prawf dyblyg, gorchuddiwyd un botel, a ddefnyddiwyd fel rheolydd, â 2.0 mL o aseton. Ailddefnyddiwyd pob potel drwy gydol yr arbrofion ar ôl glanhau'n briodol yn ôl y weithdrefn a ddisgrifiwyd gan Denlinger et al. a Sefydliad Iechyd y Byd [22, 23].
Y diwrnod ar ôl paratoi'r pryfleiddiad, tynnwyd 30–40 o fosgitos a ddaliwyd yn y gwyllt (benywod llwglyd) o'r cewyll mewn ffiolau a'u chwythu'n ysgafn i bob ffiol. Defnyddiwyd tua'r un nifer o bryfed ar gyfer pob potel wedi'i gorchuddio â phryfleiddiad, gan gynnwys y potel reoli. Ailadroddwch hyn o leiaf bum i chwe gwaith ym mhob pentref. Ar ôl 40 munud o ddod i gysylltiad â'r pryfleiddiad, cofnodwyd nifer y pryfed a darodd i lawr. Daliwyd pob pryf gyda sugnwr mecanyddol, eu rhoi mewn cynwysyddion cardbord peint wedi'u gorchuddio â rhwyll mân, a'u rhoi mewn deorydd ar wahân o dan yr un amodau lleithder a thymheredd gyda'r un ffynhonnell fwyd (peli cotwm wedi'u socian mewn toddiant siwgr 30%) â'r cytrefi heb eu trin. Cofnodwyd marwolaethau 24 awr ar ôl dod i gysylltiad â'r pryfleiddiad. Dyrannwyd ac archwiliwyd pob mosgito i gadarnhau hunaniaeth rhywogaeth. Perfformiwyd yr un weithdrefn gyda'r pryfed epil F1. Cofnodwyd cyfraddau taro i lawr a marwolaethau 24 awr ar ôl dod i gysylltiad. Os oedd marwolaethau yn y poteli rheoli < 5%, ni wnaed unrhyw gywiriad marwolaethau yn yr atgynhyrchiadau. Os oedd y gyfradd marwolaethau yn y botel reoli yn ≥ 5% ac yn ≤ 20%, cywirwyd y gyfradd marwolaethau ym mhoteli prawf yr atgynhyrchiad hwnnw gan ddefnyddio fformiwla Abbott. Os oedd y gyfradd marwolaethau yn y grŵp rheoli yn fwy na 20%, cafodd y grŵp prawf cyfan ei gwaredu [24, 25, 26].
Marwolaethau cymedrig mosgitos P. argentipes a ddaliwyd yn y gwyllt. Mae bariau gwall yn cynrychioli gwallau safonol y cymedr. Mae croestoriad y ddwy linell lorweddol goch â'r graff (marwolaethau o 90% a 98%, yn y drefn honno) yn nodi'r ffenestr marwolaethau lle gall ymwrthedd ddatblygu.[25]
Marwolaethau cymedrig epil F1 o P. argentipes a ddaliwyd yn y gwyllt. Mae bariau gwall yn cynrychioli gwallau safonol y cymedr. Mae'r cromliniau sy'n cael eu croestorri gan y ddwy linell lorweddol goch (marwolaethau o 90% a 98%, yn y drefn honno) yn cynrychioli'r ystod o farwolaethau y gall ymwrthedd ddatblygu drosto[25].
Canfuwyd bod mosgitos yn y pentref rheoli/di-IRS (Manifulkaha) yn sensitif iawn i'r pryfleiddiaid. Roedd marwolaethau cymedrig (±SE) mosgitos a ddaliwyd yn y gwyllt 24 awr ar ôl eu taro i lawr ac ar ôl dod i gysylltiad â nhw yn 99.47 ± 0.52% a 98.93 ± 0.65%, yn y drefn honno, ac roedd marwolaethau cymedrig epil F1 yn 98.89 ± 1.11% a 98.33 ± 1.11%, yn y drefn honno (Tablau 2, 3).
Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn dangos y gallai pryfed tywod coes arian ddatblygu ymwrthedd i'r pyrethroid synthetig (SP) α-cypermethrin mewn pentrefi lle defnyddiwyd y pyrethroid (SP) α-cypermethrin yn rheolaidd. Mewn cyferbyniad, canfuwyd bod pryfed tywod coes arian a gasglwyd o bentrefi nad oeddent wedi'u cynnwys yn y rhaglen IRS/rheoli yn agored iawn i niwed. Mae monitro agoredrwydd poblogaethau pryfed tywod gwyllt yn bwysig ar gyfer monitro effeithiolrwydd pryfleiddiaid a ddefnyddir, gan y gall y wybodaeth hon helpu i reoli ymwrthedd i bryfleiddiaid. Mae lefelau uchel o ymwrthedd i DDT wedi cael eu hadrodd yn rheolaidd mewn pryfed tywod o ardaloedd endemig yn Bihar oherwydd pwysau dethol hanesyddol gan yr IRS gan ddefnyddio'r pryfleiddiad hwn [1].
Canfuom fod P. argentipes yn sensitif iawn i byrethroidau, a dangosodd treialon maes yn India, Bangladesh a Nepal fod gan IRS effeithiolrwydd entomolegol uchel pan gafodd ei ddefnyddio ar y cyd â cypermethrin neu deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Yn ddiweddar, adroddodd Roy et al. [18] fod P. argentipes wedi datblygu ymwrthedd i byrethroidau yn Nepal. Dangosodd ein hastudiaeth sensitifrwydd maes fod pryfed tywod coes arian a gasglwyd o bentrefi nad oeddent wedi'u hamlygu i IRS yn sensitif iawn, ond roedd pryfed a gasglwyd o bentrefi IRS ysbeidiol/cyn ac IRS parhaus (roedd y marwolaethau'n amrywio o 90% i 97% ac eithrio pryfed tywod o Anandpur-Haruni a oedd â marwolaeth o 89.34% 24 awr ar ôl dod i gysylltiad) yn debygol o fod yn gwrthsefyll cypermethrin hynod effeithiol [25]. Un rheswm posibl dros ddatblygiad y gwrthiant hwn yw'r pwysau a roddir gan chwistrellu arferol dan do (IRS) a rhaglenni chwistrellu lleol sy'n seiliedig ar achosion, sy'n weithdrefnau safonol ar gyfer rheoli achosion o kala-azar mewn ardaloedd/blociau/pentrefi endemig (Gweithdrefn Weithredu Safonol ar gyfer Ymchwilio a Rheoli Achosion [30]. Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn darparu arwyddion cynnar o ddatblygiad pwysau dethol yn erbyn y cypermethrin hynod effeithiol. Yn anffodus, nid yw data tueddfryd hanesyddol ar gyfer y rhanbarth hwn, a gafwyd gan ddefnyddio bioasai potel y CDC, ar gael i'w gymharu; mae pob astudiaeth flaenorol wedi monitro tueddfryd P. argentipes gan ddefnyddio papur wedi'i drwytho â phryfladdwyr WHO. Y dosau diagnostig o bryfleiddiaid yn stribedi prawf WHO yw'r crynodiadau adnabod a argymhellir o bryfleiddiaid i'w defnyddio yn erbyn fectorau malaria (Anopheles gambiae), ac mae cymhwysedd gweithredol y crynodiadau hyn i bryfed tywod yn aneglur oherwydd bod pryfed tywod yn hedfan yn llai aml na mosgitos, ac yn treulio mwy o amser mewn cysylltiad â'r swbstrad yn y bioasai [23].
Mae pyrethroidau synthetig wedi cael eu defnyddio mewn ardaloedd endemig VL yn Nepal ers 1992, gan bob yn ail â'r SPs alffa-cypermethrin a lambda-cyhalothrin ar gyfer rheoli pryfed tywod [31], ac mae deltamethrin hefyd wedi cael ei ddefnyddio ym Mangladesh ers 2012 [32]. Mae ymwrthedd ffenoteipig wedi'i ganfod mewn poblogaethau gwyllt o bryfed tywod coes arian mewn ardaloedd lle mae pyrethroidau synthetig wedi cael eu defnyddio ers amser maith [18, 33, 34]. Mae mwtaniad anghyson (L1014F) wedi'i ganfod mewn poblogaethau gwyllt o bryfed tywod India ac mae wedi'i gysylltu â gwrthwynebiad i DDT, gan awgrymu bod ymwrthedd i pyrethroid yn codi ar y lefel foleciwlaidd, gan fod DDT a'r pyrethroid (alffa-cypermethrin) yn targedu'r un genyn yn system nerfol y pryfed [17, 34]. Felly, mae asesiad systematig o dueddiad i cypermethrin a monitro ymwrthedd i fosgitos yn hanfodol yn ystod y cyfnodau dileu ac ar ôl dileu.
Cyfyngiad posibl yr astudiaeth hon yw ein bod wedi defnyddio bioasai ffiol CDC i fesur tueddiad, ond defnyddiodd pob cymhariaeth ganlyniadau o astudiaethau blaenorol gan ddefnyddio pecyn bioasai WHO. Efallai na fydd canlyniadau o'r ddau bioasai yn uniongyrchol gymharol oherwydd bod bioasai ffiol CDC yn mesur cnoc-i-lawr ar ddiwedd y cyfnod diagnostig, tra bod bioasai pecyn WHO yn mesur marwolaethau 24 neu 72 awr ar ôl dod i gysylltiad (yr olaf ar gyfer cyfansoddion sy'n gweithredu'n araf) [35]. Cyfyngiad posibl arall yw nifer y pentrefi IRS yn yr astudiaeth hon o'i gymharu ag un pentref nad yw'n IRS ac un pentref nad yw'n IRS/cyn IRS. Ni allwn dybio bod lefel y tueddiad i gael mosgito a welwyd mewn pentrefi unigol mewn un ardal yn gynrychioliadol o lefel y tueddiad mewn pentrefi ac ardaloedd eraill yn Bihar. Wrth i India fynd i mewn i'r cyfnod ôl-ddileu firws lewcemia, mae'n hanfodol atal datblygiad sylweddol o wrthwynebiad. Mae angen monitro ymwrthedd yn gyflym mewn poblogaethau pryfed tywod o wahanol ardaloedd, blociau ac ardaloedd daearyddol. Mae'r data a gyflwynir yn yr astudiaeth hon yn rhagarweiniol a dylid eu gwirio trwy gymharu â'r crynodiadau adnabod a gyhoeddwyd gan Sefydliad Iechyd y Byd [35] er mwyn cael syniad mwy penodol o statws tueddol P. argentipes yn yr ardaloedd hyn cyn addasu rhaglenni rheoli cludwyr i gynnal poblogaethau isel o bryfed tywod a chefnogi dileu firws lewcemia.
Mae'n bosibl y bydd y mosgito P. argentipes, cludwr y firws lewcosis, yn dechrau dangos arwyddion cynnar o wrthwynebiad i'r cypermethrin hynod effeithiol. Mae angen monitro ymwrthedd i bryfleiddiaid yn rheolaidd mewn poblogaethau gwyllt o P. argentipes er mwyn cynnal effaith epidemiolegol ymyriadau rheoli fectorau. Mae cylchdroi pryfleiddiaid â gwahanol ddulliau gweithredu a/neu werthuso a chofrestru pryfleiddiaid newydd yn angenrheidiol ac yn cael ei argymell i reoli ymwrthedd i bryfleiddiaid a chefnogi dileu'r firws lewcosis yn India.
Amser postio: Chwefror-17-2025