Mae leishmaniasis visceral (VL), a elwir yn kala-azar yn is-gyfandir India, yn glefyd parasitig a achosir gan y protosoad fflag Leishmania a all fod yn angheuol os na chaiff ei drin yn brydlon. Y pryf tywod Phlebotomus argentipes yw'r unig fector o VL sydd wedi'i gadarnhau yn Ne-ddwyrain Asia, lle caiff ei reoli gan chwistrellu gweddilliol dan do (IRS), pryfleiddiad synthetig. Mae'r defnydd o DDT mewn rhaglenni rheoli VL wedi arwain at ddatblygiad ymwrthedd mewn pryfed tywod, felly mae DDT wedi'i ddisodli gan y pryfleiddiad alffa-cypermethrin. Fodd bynnag, mae alffa-cypermethrin yn gweithredu'n debyg i DDT, felly mae'r risg o ymwrthedd mewn pryfed tywod yn cynyddu o dan straen a achosir gan amlygiad dro ar ôl tro i'r pryfleiddiad hwn. Yn yr astudiaeth hon, fe wnaethom asesu tueddiad mosgitos gwyllt a'u hepil F1 gan ddefnyddio bio-assay potel CDC.
Casglwyd mosgitos o 10 pentref yn ardal Muzaffarpur yn Bihar, India. Parhaodd wyth pentref i ddefnyddio cryfder uchelcypermethrinar gyfer chwistrellu dan do, rhoddodd un pentref y gorau i ddefnyddio cypermethrin cryfder uchel ar gyfer chwistrellu dan do, ac ni ddefnyddiodd un pentref erioed cypermethrin cryfder uchel ar gyfer chwistrellu dan do. Amlygwyd y mosgitos a gasglwyd i ddos diagnostig a ddiffiniwyd ymlaen llaw am amser diffiniedig (3 μg/ml am 40 munud), a chofnodwyd y gyfradd dymchwel a marwolaethau 24 h ar ôl dod i gysylltiad.
Roedd cyfraddau lladd mosgitos gwyllt yn amrywio o 91.19% i 99.47%, ac roedd cyfraddau eu cenedlaethau F1 yn amrywio o 91.70% i 98.89%. Bedair awr ar hugain ar ôl dod i gysylltiad â nhw, roedd marwolaethau mosgitos gwyllt yn amrywio o 89.34% i 98.93%, ac roedd cyfraddau eu cenhedlaeth F1 yn amrywio o 90.16% i 98.33%.
Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn dangos y gall ymwrthedd ddatblygu yn P. argentipes, sy'n dynodi'r angen am fonitro parhaus a gwyliadwriaeth er mwyn cadw rheolaeth ar ôl i'r gwarediad gael ei gyflawni.
Mae leishmaniasis visceral (VL), a elwir yn kala-azar yn is-gyfandir India, yn glefyd parasitig a achosir gan y protosoad fflag Leishmania ac a drosglwyddir trwy frathiad pryfed tywod benywaidd heintiedig (Diptera: Myrmecophaga). Pryfed tywod yw'r unig fector o VL sydd wedi'i gadarnhau yn Ne-ddwyrain Asia. Mae India yn agos at gyrraedd y nod o ddileu VL. Fodd bynnag, er mwyn cynnal cyfraddau mynychder isel ar ôl dileu, mae'n hanfodol lleihau'r boblogaeth fector i atal trosglwyddo posibl.
Mae rheolaeth mosgito yn Ne-ddwyrain Asia yn cael ei gyflawni trwy chwistrellu gweddilliol dan do (IRS) gan ddefnyddio pryfleiddiaid synthetig. Mae ymddygiad gorffwys cyfrinachol y coesau arian yn ei wneud yn darged addas ar gyfer rheoli pryfleiddiad trwy chwistrellu gweddilliol dan do [1]. Mae chwistrellu gweddilliol dan do o dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT) o dan y Rhaglen Genedlaethol Rheoli Malaria yn India wedi cael effeithiau gorlifo sylweddol wrth reoli poblogaethau mosgito a lleihau achosion VL yn sylweddol [2]. Ysgogodd y rheolaeth anfwriadol hon ar VL Raglen Dileu VL India i fabwysiadu chwistrellu gweddilliol dan do fel y prif ddull o reoli coesau arian. Yn 2005, llofnododd llywodraethau India, Bangladesh, a Nepal femorandwm cyd-ddealltwriaeth gyda'r nod o ddileu VL erbyn 2015 [3] . Anelwyd ymdrechion dileu, a oedd yn cynnwys cyfuniad o reolaeth fector a diagnosis a thriniaeth gyflym o achosion dynol, at fynd i mewn i'r cyfnod cydgrynhoi erbyn 2015, targed a adolygwyd wedyn i 2017 ac yna 2020.[4] Mae'r map ffordd byd-eang newydd i ddileu clefydau trofannol sydd wedi'u hesgeuluso yn cynnwys dileu VL erbyn 2030.[5]
Wrth i India gyrraedd cyfnod ôl-ddileu BCVD, mae'n hanfodol sicrhau nad yw ymwrthedd sylweddol i beta-cypermethrin yn datblygu. Y rheswm am y gwrthiant yw bod gan DDT a cypermethrin yr un mecanwaith gweithredu, sef eu bod yn targedu'r protein VGSC[21]. Felly, gall y risg o ddatblygu ymwrthedd mewn pryfed tywod gael ei gynyddu gan straen a achosir gan amlygiad rheolaidd i cypermethrin hynod bwerus. Felly mae'n hanfodol monitro a nodi poblogaethau posibl o bryfed tywod sy'n gallu gwrthsefyll y pryfleiddiad hwn. Yn y cyd-destun hwn, amcan yr astudiaeth hon oedd monitro statws tueddiad pryfed tywod gwyllt gan ddefnyddio dosau diagnostig a chyfnodau datguddio a bennwyd gan Chaubey et al. [20] astudiodd P. argentipes o wahanol bentrefi yn ardal Muzaffarpur yn Bihar, India, a oedd yn defnyddio systemau chwistrellu dan do yn barhaus wedi'u trin â cypermethrin (pentrefi IPS parhaus). Cymharwyd statws tueddiad argentipiaid P. gwyllt o bentrefi a oedd wedi rhoi'r gorau i ddefnyddio systemau chwistrellu dan do wedi'u trin â cypermethrin (pentrefi IPS blaenorol) a'r rhai nad oeddent erioed wedi defnyddio systemau chwistrellu dan do wedi'u trin â cypermethrin (pentrefi nad oeddent yn IPS) gan ddefnyddio bioassay potel CDC.
Dewiswyd deg pentref ar gyfer yr astudiaeth (Ffig. 1; Tabl 1), ac roedd gan wyth ohonynt hanes o chwistrellu parhaus dan do o pyrethroidau synthetig (hypermethrin; a ddynodwyd fel pentrefi hypermethrin parhaus) ac roedd ganddynt achosion VL (o leiaf un achos) yn ystod y 3 blynedd diwethaf. O'r ddau bentref sy'n weddill yn yr astudiaeth, dewiswyd un pentref nad oedd yn chwistrellu beta-cypermethrin dan do (pentref chwistrellu nad yw'n dan do) fel y pentref rheoli a dewiswyd y pentref arall a gafodd chwistrellu beta-cypermethrin dan do yn ysbeidiol (pentref chwistrellu dan do ysbeidiol / cyn bentref chwistrellu dan do) fel y pentref rheoli. Roedd dewis y pentrefi hyn yn seiliedig ar gydgysylltu â'r Adran Iechyd a'r Tîm Chwistrellu Dan Do a dilysu'r Cynllun Gweithredu Micro Chwistrellu Dan Do yn Ardal Muzaffarpur.
Map daearyddol o ardal Muzaffarpur yn dangos lleoliadau pentrefi a gynhwyswyd yn yr astudiaeth (1-10). Lleoliadau astudio: 1, Manifulkaha; 2, Ramdas Majhauli; 3, Madhubani; 4, Anandpur Haruni; 5, Pandey; 6, Hirapur; 7, Madhopur Hazari; 8, Hamidpur; 9, Noonfara; 10, Simara. Paratowyd y map gan ddefnyddio meddalwedd QGIS (fersiwn 3.30.3) ac Open Assessment Shapefile.
Paratowyd y poteli ar gyfer yr arbrofion datguddiad yn unol â dulliau Chaubey et al. [20] a Denlinger et al. [22]. Yn gryno, paratowyd poteli gwydr 500 mL ddiwrnod cyn yr arbrawf ac roedd wal fewnol y poteli wedi'i gorchuddio â'r pryfleiddiad a nodwyd (y dos diagnostig o α-cypermethrin oedd 3 μg/mL) trwy gymhwyso hydoddiant aseton o'r pryfleiddiad (2.0 mL) i waelod, waliau a chap y poteli. Yna cafodd pob potel ei sychu ar rholer mecanyddol am 30 munud. Yn ystod y cyfnod hwn, dadsgriwiwch y cap yn araf i ganiatáu i'r aseton anweddu. Ar ôl 30 munud o sychu, tynnwch y cap a chylchdroi'r botel nes bod yr holl aseton wedi anweddu. Yna gadawyd y poteli ar agor i sychu dros nos. Ar gyfer pob prawf arall, roedd un botel, a ddefnyddiwyd fel rheolydd, wedi'i gorchuddio â 2.0 ml o aseton. Cafodd yr holl boteli eu hailddefnyddio trwy gydol yr arbrofion ar ôl eu glanhau'n briodol yn unol â'r weithdrefn a ddisgrifiwyd gan Denlinger et al. a Sefydliad Iechyd y Byd [ 22 , 23 ].
Ar y diwrnod ar ôl paratoi pryfleiddiad, tynnwyd 30-40 o fosgitos a ddaliwyd yn wyllt (merched wedi newynu) o'r cewyll mewn ffiolau a'u chwythu'n ysgafn i bob ffiol. Defnyddiwyd tua’r un nifer o bryfed ar gyfer pob potel wedi’i gorchuddio â phryfleiddiad, gan gynnwys y rheolydd. Ailadroddwch hyn o leiaf pump i chwe gwaith ym mhob pentref. Ar ôl 40 munud o ddod i gysylltiad â'r pryfleiddiad, cofnodwyd nifer y pryfed a gafodd eu dymchwel. Cafodd yr holl bryfed eu dal gyda allsugnwr mecanyddol, eu gosod mewn cynwysyddion cardbord peint wedi'u gorchuddio â rhwyll fân, a'u gosod mewn deorydd ar wahân o dan yr un amodau lleithder a thymheredd gyda'r un ffynhonnell fwyd (peli cotwm wedi'u socian mewn hydoddiant siwgr 30%) â'r cytrefi heb eu trin. Cofnodwyd marwolaethau 24 awr ar ôl dod i gysylltiad â'r pryfleiddiad. Cafodd pob mosgito ei rannu a'i archwilio i gadarnhau hunaniaeth rhywogaeth. Perfformiwyd yr un weithdrefn gyda'r pryfed epil F1. Cofnodwyd cyfraddau cwympo a marwolaethau 24 awr ar ôl dod i gysylltiad. Os oedd y marwolaethau yn y poteli rheoli yn <5%, ni wnaed unrhyw gywiriad marwolaethau yn yr atgynhyrchiadau. Os oedd marwolaethau yn y botel reoli yn ≥ 5% a ≤ 20%, cywirwyd marwolaethau yn y poteli prawf o'r atgynhyrchiad hwnnw gan ddefnyddio fformiwla Abbott. Os oedd marwolaethau yn y grŵp rheoli yn fwy na 20%, cafodd y grŵp prawf cyfan ei ddileu [24, 25, 26].
Marwolaethau cymedrig mosgitos P. argentipes a ddaliwyd yn wyllt. Mae bariau gwall yn cynrychioli gwallau safonol y cymedr. Mae croestoriad y ddwy linell lorweddol goch â'r graff (marwolaethau 90% a 98%, yn y drefn honno) yn dangos y ffenestr marwolaethau lle gall ymwrthedd ddatblygu.[25]
Marwolaethau cymedrig epil F1 P. argentipiaid a ddaliwyd yn wyllt. Mae bariau gwall yn cynrychioli gwallau safonol y cymedr. Mae'r cromliniau a groestorir gan y ddwy linell lorweddol goch (marwolaethau 90% a 98%, yn y drefn honno) yn cynrychioli'r ystod o farwolaethau y gall ymwrthedd ddatblygu drostyn nhw[25].
Canfuwyd bod mosgitos yn y pentref rheoli/heb fod yn IRS (Manifulkaha) yn sensitif iawn i'r pryfleiddiaid. Marwolaethau cymedrig (±SE) mosgitos a ddaliwyd yn wyllt 24 h ar ôl dymchwel ac amlygiad oedd 99.47 ± 0.52% a 98.93 ± 0.65%, yn y drefn honno, a marwolaethau cymedrig epil F1 oedd 98.89 ± 1.11% a 98.31 ± 1,13% yn y drefn honno.
Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn dangos y gall pryfed tywod coes arian ddatblygu ymwrthedd i'r pyrethroid synthetig (SP) α-cypermethrin mewn pentrefi lle defnyddiwyd y pyrethroid (SP) α-cypermethrin yn rheolaidd. Mewn cyferbyniad, canfuwyd bod pryfed tywod coes arian a gasglwyd o bentrefi nad oeddent yn dod o dan yr IRS/rhaglen reoli yn agored iawn i niwed. Mae monitro tueddiad poblogaethau pryfed tywod gwyllt yn bwysig ar gyfer monitro effeithiolrwydd y pryfladdwyr a ddefnyddir, gan y gallai'r wybodaeth hon helpu i reoli ymwrthedd i bryfladdwyr. Mae lefelau uchel o ymwrthedd i DDT wedi cael eu hadrodd yn rheolaidd mewn pryfed tywod o ardaloedd endemig o Bihar oherwydd pwysau dethol hanesyddol gan yr IRS gan ddefnyddio'r pryfleiddiad hwn [ 1 ].
Canfuom fod P. argentips yn sensitif iawn i byrethroidau, a dangosodd treialon maes yn India, Bangladesh a Nepal fod gan IRS effeithiolrwydd entomolegol uchel o'i ddefnyddio mewn cyfuniad â cypermethrin neu deltamethrin [19, 26, 27, 28, 29]. Yn ddiweddar, mae Roy et al. [18] adroddodd fod P. argentipes wedi datblygu ymwrthedd i pyrethroidau yn Nepal. Dangosodd ein hastudiaeth tueddiad maes fod pryfed tywod coes arian a gasglwyd o bentrefi diamddiffyn heb fod yn IRS yn agored iawn i niwed, ond roedd pryfed a gasglwyd o bentrefi IRS ysbeidiol/hen ac IRS parhaus (marwolaeth yn amrywio o 90% i 97% ac eithrio pryfed tywod o Anandpur-Haruni a oedd â 89.34% o farwolaethau ar 25 h postpermethin yn debygol o wrthsefyll tra effeithiol). Un rheswm posibl dros ddatblygiad y gwrthiant hwn yw'r pwysau a roddir gan chwistrellu arferol dan do (IRS) a rhaglenni chwistrellu lleol yn seiliedig ar achosion, sef gweithdrefnau safonol ar gyfer rheoli achosion o kala-azar mewn ardaloedd / blociau / pentrefi endemig (Gweithdrefn Weithredu Safonol ar gyfer Ymchwilio a Rheoli Achosion [30]. Mae canlyniadau'r astudiaeth hon yn rhoi arwyddion cynnar o ddatblygiad pwysau detholus, hynod effeithiol ar gyfer y rhanbarth data hanesyddol, hynod effeithiol a gafwyd yn erbyn y data hanesyddol cyper. defnyddio'r bioassay potel CDC, nid ydynt ar gael i'w cymharu; mae pob astudiaeth flaenorol wedi monitro tueddiad P. argentipes gan ddefnyddio papur wedi'i drwytho gan bryfleiddiad WHO Y dosau diagnostig o bryfleiddiad yn stribedi prawf Sefydliad Iechyd y Byd yw'r crynodiadau adnabod a argymhellir o bryfleiddiaid i'w defnyddio yn erbyn fectorau malaria (Anopheles gambiae), a chymhwysedd gweithredol y pryfed tywodlyd na'r pryfed tywodlyd hyn yn aml. a threulio mwy o amser mewn cysylltiad â'r swbstrad yn y bioassay [23].
Mae pyrethroidau synthetig wedi cael eu defnyddio mewn ardaloedd endemig VL yn Nepal ers 1992, bob yn ail â'r SPs alffa-cypermethrin a lambda-cyhalothrin ar gyfer rheoli pryfed tywod [31], ac mae deltamethrin hefyd wedi'i ddefnyddio ym Mangladesh ers 2012 [32]. Mae ymwrthedd ffenotypig wedi'i ganfod mewn poblogaethau gwyllt o bryfed tywod coes arian mewn ardaloedd lle mae pyrethroidau synthetig wedi cael eu defnyddio ers amser maith [ 18 , 33 , 34 ]. Mae treiglad nad yw'n gyfystyr (L1014F) wedi'i ganfod mewn poblogaethau gwyllt o'r pryf tywod Indiaidd ac wedi'i gysylltu ag ymwrthedd i DDT, gan awgrymu bod ymwrthedd pyrethroid yn codi ar y lefel moleciwlaidd, gan fod DDT a'r pyrethroid (alpha-cypermethrin) yn targedu'r un genyn yn y system nerfol pryfed [17, 3]. Felly, mae asesiad systematig o dueddiad cypermethrin a monitro ymwrthedd mosgito yn hanfodol yn ystod y cyfnodau dileu ac ôl-ddileu.
Cyfyngiad posibl yr astudiaeth hon yw ein bod wedi defnyddio bio-assay vial CDC i fesur tueddiad, ond roedd pob cymhariaeth yn defnyddio canlyniadau o astudiaethau blaenorol gan ddefnyddio pecyn bioassay WHO. Efallai na fydd modd cymharu canlyniadau’r ddau fio-ddarlleniad yn uniongyrchol oherwydd bod bio-assay ffiol y CDC yn mesur dymchweliad ar ddiwedd y cyfnod diagnostig, tra bod bioassay cit WHO yn mesur marwolaethau 24 neu 72 awr ar ôl y datguddiad (yr olaf ar gyfer cyfansoddion sy’n gweithredu’n araf) [35]. Cyfyngiad posibl arall yw nifer y pentrefi IRS yn yr astudiaeth hon o'i gymharu ag un pentref nad yw'n IRS ac un pentref nad yw'n IRS / cyn bentref IRS. Ni allwn gymryd yn ganiataol bod lefel y tueddiad i fectorau mosgito a welir mewn pentrefi unigol mewn un ardal yn cynrychioli lefel y tueddiad mewn pentrefi ac ardaloedd eraill yn Bihar. Wrth i India fynd i mewn i gyfnod ôl-ddileu firws lewcemia, mae'n hanfodol atal datblygiad sylweddol o wrthwynebiad. Mae angen monitro ymwrthedd yn gyflym mewn poblogaethau pryfed tywod o wahanol ardaloedd, blociau ac ardaloedd daearyddol. Mae'r data a gyflwynir yn yr astudiaeth hon yn rhagarweiniol a dylid eu gwirio trwy gymharu â'r crynodiadau adnabod a gyhoeddwyd gan Sefydliad Iechyd y Byd [35] i gael syniad mwy penodol o statws tueddiad P. argentipes yn yr ardaloedd hyn cyn addasu rhaglenni rheoli fector i gynnal poblogaethau pryfed tywod isel a chefnogi dileu firws lewcemia.
Efallai y bydd y mosgito P. argentipes, fector y firws leukosis, yn dechrau dangos arwyddion cynnar o wrthwynebiad i'r cypermethrin hynod effeithiol. Mae angen monitro ymwrthedd pryfleiddiad yn rheolaidd mewn poblogaethau gwyllt o P. argentipes i gynnal effaith epidemiolegol ymyriadau rheoli fectorau. Mae cylchdroi pryfladdwyr gyda gwahanol ddulliau o weithredu a/neu werthuso a chofrestru pryfleiddiaid newydd yn angenrheidiol ac yn cael ei argymell i reoli ymwrthedd i bryfleiddiad a chefnogi dileu firws lewcosis yn India.
Amser post: Chwefror-17-2025